Презентация на тему: Занятие 5. Хроматин и хромосомы

Занятие 5. Хроматин и хромосомы
ДНК
Нуклеосома
Нуклеосома
Гистоновые белки
Изоформы гистонов
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Гистоновый код
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Восстановление нуклеосом после репликации
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
30 нм фибрилла
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Негистоновые белки
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Хромосомные препараты
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Приготовление хромосомных препаратов
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
Занятие 5. Хроматин и хромосомы
N- бэндинг
FISH
Хромосомные территории
1/33
Средняя оценка: 4.7/5 (всего оценок: 11)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (50971 Кб)
1

Первый слайд презентации: Занятие 5. Хроматин и хромосомы

Доронина Татьяна Валерьевна 2019 год Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова Биологический факультет Кафедра клеточной биологии и гистологии

Изображение слайда
2

Слайд 2: ДНК

На каждый виток ДНК приходится 10,4 пар нуклеотидов

Изображение слайда
3

Слайд 3: Нуклеосома

Изображение слайда
4

Слайд 4: Нуклеосома

Коровая частица Октамер гистонов ДНК – 146 п.н., 1,75 оборота Линкер (8 – 114 п.н., в среднем 54 п.н.), 30 п.н. – в комплексе с гистоном H1, остальное – свободная ДНК Нуклеосома содержит 200 п.н. ДНК 200 п.н. длиной 68 нм уложены в глобулу величиной 10 нм Нуклеосома

Изображение слайда
5

Слайд 5: Гистоновые белки

H3 и H4 – аргинин-богатые, консервативные H2A и H2B – умеренно обогащенные лизином, есть межвидовые вариации H1 – лизин-богатые, очень вариабельны входят в состав коровой частицы нуклеосомы в линкерном участке

Изображение слайда
6

Слайд 6: Изоформы гистонов

Гистон H1 : гистон H5 - в неактивных ядрах эритроцитов птиц у мыши – 8 вариантов Гистон H3 : CENP-A – в центромере H3.3 - в транскрипционно -активном хроматине H3.1t – в клетках семенников Гистон H2B : hTSH2B и H2BFWT – специфичные для клеток семенников и сперматозоидов Гистон H2 А: macroH2A - в неактивной копии Х-хромосомы млекопитающих H2A.Bbd – компонент активного хроматина H2A.Z γH2A.X - маркирует места разрывов в ДНК

Изображение слайда
7

Слайд 7

Изображение слайда
8

Слайд 8: Гистоновый код

ацетилирование лизиновых остатков, метилирование лизиновых, аргининовых и гистидиновых остатков, фосфорилирование остатков треонина и серина, сумоилирование и убиквитинилирование лизиновых остатков поли-АДФ- рибозилирование остатков глутаминовой кислоты

Изображение слайда
9

Слайд 9

Изображение слайда
10

Слайд 10: Восстановление нуклеосом после репликации

Изображение слайда
11

Слайд 11

Нуклеосомные фибриллы, ТЭМ, позитивное контрастирование линкерные участки (линкеры) нуклеосомы

Изображение слайда
12

Слайд 12

Нуклеосомы, ТЭМ, негативное контрастирование линкерные участки (линкеры) нуклеосомы

Изображение слайда
13

Слайд 13: 30 нм фибрилла

при повышении ионной силы (до 60 мМ ) либо при добавлении ионов Mg2+ до 0,3 мМ соленоид - в одном витке ( с шагом в 11 нм ) содержится 6 нуклеосом супербиды – при концентрации двухвалентных катионов не ниже 1мМ для упаковки ДНК в 30-нм фибриллу существенны взаимодействия между соседними нуклеосомными глобулами гистон H1 стабилизирует 30-нм фибриллу, но не определяет ее архитектуру.

Изображение слайда
14

Слайд 14

30 нм фибриллы, выделенные из ядер эритроцита тритона, ТЭМ, позитивное контрастирование

Изображение слайда
15

Слайд 15

30 нм фибриллы, ТЭМ, негативное контрастирование нуклеомеры

Изображение слайда
16

Слайд 16: Негистоновые белки

HMG - high mobility group HP1 - heterochromatin protein 1 белки группы Polycomb, белок MENT ( терминально дифференцированные клетки, MeCP2 (methyl- CpG binding protein 2) позвоночных животных и Sir- белки дрожжей Регуляторные белки, ферменты

Изображение слайда
17

Слайд 17

Изображение слайда
18

Слайд 18

Элементы хромонемы в деконденсированных хромосомах, ТЭМ хромомеры

Изображение слайда
19

Слайд 19

Элементы хромонемы в анафазных хромосомах, ТЭМ

Изображение слайда
20

Слайд 20

Выделенная хромосома из клетки китайского хомячка, ТЭМ

Изображение слайда
21

Слайд 21

Изображение слайда
22

Слайд 22: Хромосомные препараты

Изображение слайда
23

Слайд 23

митотические хромосомы микро-трубочки веретена деления центриоли Ультраструктура клеток СПЭВ на стадии анафазы, ТЭМ

Изображение слайда
24

Слайд 24

Петли ДНК, отходящие от осевого скэффолда

Изображение слайда
25

Слайд 25: Приготовление хромосомных препаратов

1. Использование колхицин а – разборка митотического веретена. 2. Гипотонический шок с использованием растворов солей калия или натрия, которые вследствие разницы осмотического давления внутри и снаружи клеток вызывают их набухание.. 3. Фиксация клеток с использованием этанола и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1 4. Раскапывание суспензии клеток на предметные стекла. 5. Окрашивание хромосомных препаратов.

Изображение слайда
26

Слайд 26

G- бэндинг Обработка хромосомных препаратов трипсином или солевыми растворами → окраска красителем Гимза

Изображение слайда
27

Слайд 27

Q- бэндинг Окраска флуоресцентным красителем кинакрином

Изображение слайда
28

Слайд 28

Обработка хромосомных препаратов горячим фосфатным буфером → окрашивание красителем Гимза либо флуорохромом оранжевым акридином Картина обратная G- бэндингу R- бэндинг

Изображение слайда
29

Слайд 29

С - бэндинг Обработка 5 %- ным (насыщенным) раствором гидроокиси бария, инкубация в сбалансированном солевом растворе (2˟SSC) при 60 С и кратковременную окраску красителем Гимза Выявление центромер

Изображение слайда
30

Слайд 30

T- бэндинг Выявление теломер

Изображение слайда
31

Слайд 31: N- бэндинг

Выявление ядрышковых организаторов

Изображение слайда
32

Слайд 32: FISH

Изображение слайда
33

Последний слайд презентации: Занятие 5. Хроматин и хромосомы: Хромосомные территории

Изображение слайда