Презентация на тему: Занятие №3

Занятие №3
Особенности вирусов
РНК - содержащие вирусы
ДНК-содержащие вирусы
Строение вирусов
О сновные этапы репродукции вирусов в клетке
Культивирование и индикация вирусов
Индикацию вирусов проводят на основе следующих феноменов:
Цитопатическое действие
Методы определения вида и типа вирусов:
Типы клеточных культур
Специальные питательные среды для культур клеток
Занятие №3
ПЕРЕВИВАЕМАЯ ЛИНИЯ КЛЕТОК ПОЧКИ ЭМБРИОНА ТЕЛЯТ
MDBK клеточные культуры на 7-й день после заражения
Выявляемые проявления вирусной инфекции клеточных культур
ЦПД - видимые под микроскопом морфологические изменения клеток (вплоть до их отторжения от стекла), возникающие в результате внутриклеточной репродукции вирусов
Включения — скопление вирионов или отдельных их компонентов в цитоплазме или ядре клеток, выявляемые под микроскопом при специальном окрашивании. Вирус
Бляшки, или “негативные” колонии — ограниченные участки разрушенных вирусами клеток, культивируемых на питательной среде под агаровым покрытием, видимые как
Занятие №3
Занятие №3
РГА( реакция гемагглютинации) основана на способности некоторых вирусов вызывать агглютинацию (склеивание) эритроцитов за счет вирусных гликопротеиновых шипов
Реакция гемадсорбции — способность культур клеток, инфицированных вирусами, адсорбировать на своей поверхности эритроциты.
1/23
Средняя оценка: 4.5/5 (всего оценок: 68)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (1930 Кб)
1

Первый слайд презентации: Занятие №3

Тема: Морфология и физиология вирусов Цель: получить представление о биологии вирусов: их положении в системе живых организмов, особенностях организации, строении вириона; изучить принципы современной классификации вирусов; этапы взаимодействия вирусов с чувствительными клетками; методы культивирования вирусов, признаки размножения вирусов в клетке. Познакомиться с методами лабораторной диагностики вирусных инфекций.

Изображение слайда
2

Слайд 2: Особенности вирусов

Вирусы - м е л ь ч а й ш и е микробы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей системы, содержащие только ДНК или РНК. Относятся к царству Vira. Являясь облигатными внутриклеточными паразитами, вирусы размножаются в цитоплазме или ядре клетки. Они - автономные генетические структуры. Отличаются особым - разобщенным ( дисъюнктивным ) способом размножения (репродукции): в клетке отдельно синтезируются нуклеиновые кислоты вирусов и их белки, затем происходит их сборка в вирусные частицы. Сформированная вирусная частица называется вирионом.

Изображение слайда
3

Слайд 3: РНК - содержащие вирусы

В ирусы, в которых РНК способна к репликации (редупликации ) Род   Cardoreovirus  (1 вид) Род  Mimoreovirus  —  Мимореовирусы (1 вид) Род  Orbivirus  —  Орбивирусы (22 вида) Род  Phytoreovirus  (3 вида) Род  Rotavirus  —  Ротавирусы  (9 видов) Род  Seadornavirus  (3 вида) В ирусы, содержащие одноцепочечную (+)РНК семейства   Astroviridae,  Caliciviridae,  Coronaviridae,  Flaviviridae,  Picornaviridae,  Arteriviridae   и  Togaviridae. В ирусы, содержащие одноцепочечную (−)РНК Bunyavirales,  Arenaviridae,  Orthomyxoviridae,  Paramyxoviridae,  Filoviridae,  Rhabdoviridae   и  Deltavirus. вирусы, содержащие одноцепочечную (+)РНК, реплицирующиеся через стадию ДНК Ретровирусы, ВИЧ

Изображение слайда
4

Слайд 4: ДНК-содержащие вирусы

В ирусы, содержащие двуцепочечную ДНК Herpesviridae,  Adenoviridae   и  Papovaviridae. Вирусы, содержащие одноцепочечную ДНК Circoviridae   и  Parvoviridae В ирусы, содержащие двуцепочечную ДНК, реплицирующиеся через стадию одноцепочечной РНК Hepadnaviridae

Изображение слайда
5

Слайд 5: Строение вирусов

Простые Сложные

Изображение слайда
6

Слайд 6: О сновные этапы репродукции вирусов в клетке

1) адсорбция вирионов на клетке; 2 ) проникновение вируса в клетку; 3) “раздевание” и высвобождение вирусного генома ( депротеинизация вируса); 4) синтез вирусных компонентов; 5) формирование вирусов; 6) выход вирионов из клетки.

Изображение слайда
7

Слайд 7: Культивирование и индикация вирусов

Вирусы культивируют в организме лабораторных животных, в развивающихся куриных эмбрионах и культурах клеток (тканей ).

Изображение слайда
8

Слайд 8: Индикацию вирусов проводят на основе следующих феноменов:

цитопатогенного действия (ЦПД) вирусов, образования внутриклеточных включений, образования “бляшек”, реакции гемагглютинации, гемадсорбции или “цветной” реакции

Изображение слайда
9

Слайд 9: Цитопатическое действие

возникновение в клетках видимых морфологических дегенеративных изменений (литическая инфекция) Микроскопия препаратов с чистой культурой ткани и с культурой ткани с цитопатическим действием вируса полиомиелита (вакцинный штамм). ЦПД Нормальные клетки

Изображение слайда
10

Слайд 10: Методы определения вида и типа вирусов:

Реакция нейтрализации (РН) Реакция гемагглютинации ( РГА ) Реакция торможения гемагглютинации (РТГА ) Метод иммунофлюорисценци (РИФ) Биологические модели для индикации и идентификации вирусов (мыши, крысы, кролики, морские свинки)

Изображение слайда
11

Слайд 11: Типы клеточных культур

Изображение слайда
12

Слайд 12: Специальные питательные среды для культур клеток

Используются разнообразные синтетические вирусологические питательные среды сложного состава, включающие большой набор различных факторов роста- среда 199, Игла, раствор Хэнкса, гидролизат лактальбумина. В среды добавляют стабилизаторы рН ( Hepes ), различные в видовом отношении сыворотки крови (наиболее эффективной считают эмбриональную телячью сыворотку), L-цистеин и L-глютамин. В зависимости от функционального использования среды могут быть  ростовые  (с большим содержанием сыворотки крови) — их используют для выращивания клеточных культур до внесения вирусных проб, и поддерживающие  (с меньшим содержанием сыворотки или ее отсутствием)- для содержания инфицированных вирусом клеточных культур.

Изображение слайда
13

Слайд 13

Не инфицированные клетки сирийского хомячка Разведение 10 6 Typical CPE Разведение 10 5 Разведение 10 4

Изображение слайда
14

Слайд 14: ПЕРЕВИВАЕМАЯ ЛИНИЯ КЛЕТОК ПОЧКИ ЭМБРИОНА ТЕЛЯТ

Изображение слайда
15

Слайд 15: MDBK клеточные культуры на 7-й день после заражения

Изображение слайда
16

Слайд 16: Выявляемые проявления вирусной инфекции клеточных культур

. 1.Цитопатический эффект. 2.Выявление телец включений. 3. Выявление вирусов методом флюоресцирующих антител (МФА), электронной микроскопией, авторадиографией. 4.Цветная проба. Обычный цвет  используемых культуральных сред, содержащих в качестве индикатора рН феноловый красный, при оптимальных для клеток условиях культивирования (рН около 7,2)- красный. Размножение клеток меняет рН и соответственно- цвет среды с красного на желтый за счет смещения рН в кислую сторону. При размножении в клеточных культурах вирусов происходит лизис клеток, изменения рН и цвета среды не происходит. 5.Выявление гемагглютинина вирусов- гемадсорбция, гемагглютинация. 6.Метод бляшек (бляшкообразования). В результате цитолитического действия многих вирусов на клеточные культуры образуются зоны массовой гибели клеток. Выявляют бляшки- вирусные “ клеточно- негативные” колонии.

Изображение слайда
17

Слайд 17: ЦПД - видимые под микроскопом морфологические изменения клеток (вплоть до их отторжения от стекла), возникающие в результате внутриклеточной репродукции вирусов

Культура клеток ЦПД вируса

Изображение слайда
18

Слайд 18: Включения — скопление вирионов или отдельных их компонентов в цитоплазме или ядре клеток, выявляемые под микроскопом при специальном окрашивании. Вирус натуральной оспы образует цитоплазматические включения - тельца Гварниери; вирусы герпеса и аденовирусы - внутриядерные включения

Изображение слайда
19

Слайд 19: Бляшки, или “негативные” колонии — ограниченные участки разрушенных вирусами клеток, культивируемых на питательной среде под агаровым покрытием, видимые как светлые пятна на фоне окрашенных живых клеток. Один вирион образует потомство в виде одной бляшки. “Негативные” колонии разных вирусов отличаются по размеру, форме, поэтому метод бляшек используют для дифференциации вирусов, а также для определения их концентрации

Образование бляшек

Изображение слайда
20

Слайд 20

МЕТОД БЛЯШЕК

Изображение слайда
21

Слайд 21

Изображение слайда
22

Слайд 22: РГА( реакция гемагглютинации) основана на способности некоторых вирусов вызывать агглютинацию (склеивание) эритроцитов за счет вирусных гликопротеиновых шипов – гемагглютининов

РГА

Изображение слайда
23

Последний слайд презентации: Занятие №3: Реакция гемадсорбции — способность культур клеток, инфицированных вирусами, адсорбировать на своей поверхности эритроциты

Изображение слайда