Презентация на тему: В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение

В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Антигены
Бактериальные антигены (АГ)
Бактериальные антигены (АГ)
Антитела (иммуноглобулины)
Структура молекулы иммуноглобулина
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Направления использования серологических реакций
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации ( РПГА или РНГА ) для сероиндикации
РПГА
Реакция кольцепреципитации ( РП ) для сероиндикации
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Реакция иммунофлюоресценции ( РИФ ) для сероиндикации
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
ИФА для сероиндикации ( “ сэндвич ” – вариант )
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Реакция агглютинации ( РА ) для сероидентификации
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Реакция преципитации в геле ( РП ) для сероидентификации
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Принципы серодиагностики
Реакция агглютинации ( РА ) для серодиагностики
Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации ( РПГА или РНГА ) для серодиагностики
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Реакция связывания комплемента ( РСК ) для серодиагностики
Положительная РСК
Отрицательная РСК
ИФА для серодиагностики
В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение
Непрямая реакция иммунофлюоресценции ( нРИФ ) для серодиагностики
1/36
Средняя оценка: 4.5/5 (всего оценок: 93)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (3150 Кб)
1

Первый слайд презентации

В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение серологических реакций. Серологическая реакция - это реакция между антигеном и антителом in vitro, с помощью которой можно найти или неизвестный антиген (используя известное антитело), или неизвестное антитело (используя известный антиген). Свойства серологических реакций : специфичность чувствительность

Изображение слайда
2

Слайд 2: Антигены

Изображение слайда
3

Слайд 3: Бактериальные антигены (АГ)

По специфичности : 1) группоспецифические (встречаются у разных видов одного рода или семейства); 2) видоспецифические (встречаются у представителей одного вида); 3) типоспецифические (определяют серологические варианты – серовары – внутри одного вида).

Изображение слайда
4

Слайд 4: Бактериальные антигены (АГ)

По локализации в бактериальной клетке : 1) О – АГ (соматический) ЛПС (у грам -) или полисахарид (у грам+ ) клеточной стенки; термостабилен (выдерживает кипячение в течение 1–2 ч); 2) Н – АГ (жгутиковый) – белок флагеллин ; термолабилен ; 3) К – АГ (капсульный) – полисахарид (реже полипептид) капсулы; по чувствительности к температуре К - АГ подразделяются на А-, В- и L-антигены. Разновидности К - АГ : Vi – АГ, поверхностно-оболочечные АГ. 4 ) токсины и ферменты

Изображение слайда
5

Слайд 5: Антитела (иммуноглобулины)

Изображение слайда
6

Слайд 6: Структура молекулы иммуноглобулина

Изображение слайда
7

Слайд 7

Реакция АГ-АТ в системе in vitro может сопровождаться возникновением нескольких феноменов : агглютинации, преципитации, лизиса. Для визуализации результата реакции также применяют различные метки, которые прикрепляют к АГ или АТ, а затем проводят детекцию меченного реагента : флюорохромная метка для РИФ ферментная метка для ИФА радиоизотопная метка для РИА

Изображение слайда
8

Слайд 8

Реакция агглютинации (РА) (от лат. agglutinatio - склеивание) – это склеивание корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов, частиц с адсорбированными на них антигенами) антителами в присутствии электролитов. Проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например, бактерий), «склеенных» антителами. Варианты РА : прямая пассивная (непрямая)

Изображение слайда
9

Слайд 9

Реакция преципитации (РП) (от лат. p raecipi t o - осаждать) - это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Варианты РП : 1) реакция кольцепреципитации 2) реакция преципитации в геле

Изображение слайда
10

Слайд 10

Возникновение видимых невооруженным глазом агрегатов происходит в соответствии с теорией решётки : к образовавшемуся комплексу АГ-АТ последовательно присоединяются другие молекулы АТ и АГ, формируются сетевые структуры, которые превращаются в агрегаты, выпадающие в осадок. Необходимое условие образования решетки - наличие несколько антигенных детерминант на каждую молекулу АГ и по два активных центра на каждую молекулу АТ ( полные АТ ).

Изображение слайда
11

Слайд 11: Направления использования серологических реакций

Сероиндикация это обнаружение АГ возбудителя в исследуемом материале с помощью известных АТ ( диагностических сывороток ) ; реакции : РПГА РП ИФА РИФ 2. Сероидентификация это определение АГ выделенной чистой культуры с помощью известных АТ ( диагностических сывороток ) ( III этап бактериологического метода) ; реакции : РА РП

Изображение слайда
12

Слайд 12

3. Серодиагностика это обнаружение АТ к возбудителю в сыворотке крови с помощью известных АГ ( диагностикумов ) ; реакции : РПГА РА РСК нРИФ ИФА

Изображение слайда
13

Слайд 13: Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации ( РПГА или РНГА ) для сероиндикации

Ставится на стекле ( пластинчатая РПГА ) Компоненты : исследуемый материал (в нём ищут АГ) диагностическая сыворотка – суспензионные АТ (антитела к искомому АГ, адсорбированные на эритроцитах I группы крови человека) Учет визуальный : при “+” реакции - красные хлопья, при “ - ” реакции – хлопьев нет

Изображение слайда
14

Слайд 14: РПГА

Положительная (красные хлопья) Отрицательная (нет хлопьев)

Изображение слайда
15

Слайд 15: Реакция кольцепреципитации ( РП ) для сероиндикации

Реакцию ставят в узких преципитационных пробирках Компоненты : исследуемый материал (в нём ищут растворимый АГ) преципитирующая сыворотка Учет визуальный : при “+” реакции на границе двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата ; при “ - ” реакции кольца нет

Изображение слайда
16

Слайд 16

Изображение слайда
17

Слайд 17: Реакция иммунофлюоресценции ( РИФ ) для сероиндикации

Ставится на стекле Компоненты : исследуемый материал (в нём ищут АГ) люминесцирующая сыворотка (- антитела к искомому АГ, меченные ФИТЦ) Инкубация и отмывка несвязавшихся компонентов Учет с помощью люминесцентного микроскопа : при “+” реакции наблюдается специфическое (чаще – зелёное) свечение

Изображение слайда
18

Слайд 18

Изображение слайда
19

Слайд 19: ИФА для сероиндикации ( “ сэндвич ” – вариант )

Ставят в лунках планшета Компоненты : 1-ые АТ исследуемый материал (в нём ищут АГ) 2-ые АТ, меченные ферментом ( пероксидаза ). Инкубация, отмывка от несвязавшихся компонентов Для учета в конце добавляют субстрат для фермента (Н 2 О 2 ) и хромоген (ТМБ) Учет : или визуальный (изменение цвета раствора в лунке) или с помощью спектрофотометра (измеряется оптическая плотность раствора в лунке)

Изображение слайда
20

Слайд 20

Изображение слайда
21

Слайд 21

Планшет для ИФА Спектрофотометр ( ридер )

Изображение слайда
22

Слайд 22: Реакция агглютинации ( РА ) для сероидентификации

Ставится на стекле ( пластинчатая РА ) Компоненты : неидентифицированная чистая культура диагностическая агглютинирующая сыворотка Учет визуальный : при “+” реакции – белые хлопья при “ - ” реакции – равномерная мутность

Изображение слайда
23

Слайд 23

Изображение слайда
24

Слайд 24

Изображение слайда
25

Слайд 25: Реакция преципитации в геле ( РП ) для сероидентификации

Ставится в чашках Петри с питательным агаром (выполняет роль геля) Компоненты : идентифицированная чистая культура диагностическая антитоксическая сыворотка Учет визуальный : при “ + ” реакции видны белые “ усы ” (полосы) преципитации

Изображение слайда
26

Слайд 26

Изображение слайда
27

Слайд 27: Принципы серодиагностики

1. Определение количества ( титра ) АТ в сыворотке крови пациента Титр АТ соответствует максимальному разведению сыворотки пациента, в котором реакция ещё положительная. 2. Титр АТ пациента сравнить с диагностическим титром 3. Изучение изменений титра АТ в динамике (в парных сыворотках с интервалом 7 – 14 – 21 дней) 4. Определение титра АТ разных классов : IgM, IgG, IgA

Изображение слайда
28

Слайд 28: Реакция агглютинации ( РА ) для серодиагностики

Ставится в пробирках ( развернутая РА ) Компоненты : раститрованная сыворотка больного (в ней ищут АТ к определенному АГ) бактериальный диагностикум Учет визуальный : при “+” реакции – белые хлопья при “ - ” реакции – отсутствие хлопьев

Изображение слайда
29

Слайд 29: Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации ( РПГА или РНГА ) для серодиагностики

Ставится в планшете ( развернутая РПГА ) Компоненты : раститрованная сыворотка больного (в ней ищут АТ к определенному АГ) эритроцитарный диагностикум (АГ бактерий, адсорбированные на эритроцитах I группы крови человека) Учет визуальный : при “+” реакции – осадок в виде “ зонтика ” при “ - ” реакции – осадок в виде “ пуговки ”

Изображение слайда
30

Слайд 30

Изображение слайда
31

Слайд 31: Реакция связывания комплемента ( РСК ) для серодиагностики

Ставится в пробирках Компоненты: сыворотка больного (в ней ищут АТ к определенному АГ) диагностикум комплемент Для учета реакции добавляют индикаторную систему, состоящую из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки. Учет – визуальный : при “ + ” реакции – осадок из эритроцитов при “ – ” реакции – гемолиз ( “ лаковая кровь ” )

Изображение слайда
32

Слайд 32: Положительная РСК

Изображение слайда
33

Слайд 33: Отрицательная РСК

Изображение слайда
34

Слайд 34: ИФА для серодиагностики

Ставят в лунках планшета Компоненты : АГ бактерий ( диагностикум ) сыворотка пациента (в ней ищут АТ) антиглобулиновая сыворотка (АГС) (антитела к антителам), меченная ферментом Инкубация, отмывка несвязавшихся компонентов Для учета в конце реакции добавляют субстрат для фермента (Н 2 О 2 ) и хромоген (ТМБ) Учет : или визуальный (изменение цвета раствора в лунке) или с помощью спектрофотометра (измеряется оптическая плотность раствора в лунке)

Изображение слайда
35

Слайд 35

Изображение слайда
36

Последний слайд презентации: В основе иммунодиагностики инфекционных заболеваний лежит применение: Непрямая реакция иммунофлюоресценции ( нРИФ ) для серодиагностики

Ставится на стекле Компоненты : АГ бактерий ( диагностикум ) сыворотка пациента (в ней ищут АТ) антиглобулиновая сыворотка (АГС), меченная ФИТЦ Инкубация, отмывка от несвязавшихся компонентов Учет с помощью люминесцентного микроскопа : при “+” реакции наблюдается специфическое (чаще – зелёное) свечение.

Изображение слайда