Презентация на тему: Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической

Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической модуляции
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Effect of activation and blockade of pre- and postsynaptic 5-HT 1A receptors on the immune response
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
I. АГРЕССИВНОЕ, СУБМИССИВНОЕ, ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНОЕ СОСТОЯНИЕ, СФОРМИРОВАННОЕ В РЕЗУЛЬТАТЕ СОЦИАЛЬНЫХ КОНФРОНТАЦИЙ (мыши линии СВА и С57 BL /6 J )
Экспериментальные модели
Модели исследования:
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Возможности проточной цитометрии
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Процентное содержание CD4 +, CD 8 + Т-клеток и их сооотношения ( CD4 + / CD 8 + ) в периферической крови и селезенке у неиммунизированных мышей линий CBA и ASC
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Определение цитокинов методом проточной цитометрии (наборы и программа FlowCytomix)
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Данные отчета FlowCytomix по содержанию цитокинов у крыс
Содержание IL-1альфа и MCP-1 ( пг/мл) в периферической крови у агрессивных и ручных крыс
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической
1/28
Средняя оценка: 4.7/5 (всего оценок: 50)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (2988 Кб)
1

Первый слайд презентации: Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической модуляции

Изображение слайда
2

Слайд 2

1. Изменение активности серотониновых и дофаминовых структур мозга и локализованных в них медиаторных и опиоидных рецепторов. Для этого применяется а). Стереотаксическая техника – двойной цифровой стереотаксис (Stoelting C o, USA ) и микроинъекционный насос-310. Метод используется для выключения определенных структур мозга электролитическим разрушением или введением нейротоксинов. Технология является общепринятой для изучения вклада структур мозга в регуляцию различных физиологических процессов, при этом данный стереотаксис отличается от других наличием электронных датчиков перемещения по трем осям координат, которые отслеживаются на экране. Прибор позволяет определять координаты мозга с точностью от 1 мм. до 10 мк.

Изображение слайда
3

Слайд 3

EFFECT OF ELECTROLYTIC DESTRUCTION OF THE NIGROSTRIATAL AND MESOLIMBIC BRAIN STRUCTURES ON THE IMUNE RESPONSE А10 * * * * AFC/ 10 6 ( %) контроль А9 n.cd n.acc * P<0,001 compared to the control * * * * control

Изображение слайда
4

Слайд 4

б). Фармакологический анализ с системным применением препаратов нового поколения и высокоизбирательного действия, активирующих или блокирующих пре- и постсинаптические рецепторы: серотониновые 1А, 2А, дофаминовые Д1 и Д2, опиоидные мю-, капп- и дельта- рецепторы.

Изображение слайда
5

Слайд 5

Number of antibody-forming cells (AFC) in С57 BL/6J mice, receiving 8-ОН- DPAT (2). Control (1). Primary and secondary immune response in BALB / с mice, immunized with BSA (5 mg / kg ), following 5-НТР administration (2). Control (1). 1 2 Pathways of realization of immune response suppression under activation of serotoninergic ( 5-Н Tergic) system (5-НТ, 5-НТР, sertraline, 8-ОН- DPAT, DOI, iprazid ) * Increase of С D8+ Т- lymphocyte number in bone marrow under sertraline (2) administration. Control (1). 1 2 * 1 2 hypophysis adrenals

Изображение слайда
6

Слайд 6

Activation of DAergic system in old C57BL/6J mice after stress exposure elevates the immune reaction to its level in non-stressed young animals Number of AFC in Wistar rats, receiving quinpirol (2). Control (1). Pathways of realization of immune response stimulation under activation of dopaminergic (DAergic) system ( L - DOPA, amantadine, bupropion, apomorphine, quinpirol, SKF- 38393) 1 2 * 1 2 * Increase of С D4+ Т- lymphocyte number in bone marrow under bupropione administration (2). Control (1). 2,0-2,5 года 2,0-2,5 месяца stress + apomorphine thymus Control apomorphine stress 1 2 * hypophysis Young mice old mice * * * *

Изображение слайда
7

Слайд 7

Схематическое изображение серотонинергического нейрона с обозначением возможной локализации подтипов серотониновых рецепторов

Изображение слайда
8

Слайд 8: Effect of activation and blockade of pre- and postsynaptic 5-HT 1A receptors on the immune response

8-OH-DPAT 1. 0 mg / kg WAY - 100635 1. 0 mg / kg WAY - 100635 1. 0 mg / kg + 8-OH-DPAT 1. 0 mg / kg 8-OH-DPAT 0. 1 mg / kg WAY - 100635 0. 1 mg / kg WAY - 100635 0. 1 mg / kg + 8-OH-DPAT 0. 1 mg / kg *p<0,01, **P<0,001 compared to the control AFC per 10 6 cells postsynaptic 5-HT 1A receptors presynaptic 5-HT 1A receptors Control

Изображение слайда
9

Слайд 9

Изображение слайда
10

Слайд 10

2. Экспериментальное моделирование различных психоэмоциональных состояний - один из основных подходов для изучения патогенетических механизмов различных психоэмоциональных отклонений и поиска новых эффективных терапевтических средств их лечения. а). Формирование агрессивного, субмиссивного и депрессивно-подобного поведения при воздействии хронического социального стресса (метод дистантного сенсорного контакта). б). Использование моделей генетически детерминированного поведения - депрессивно-подобное поведение (мыши линии ASC- Antidepressant Sensitive Catalepsy ), повышенная агрессивность или отсутствие агрессивности у крыс.

Изображение слайда
11

Слайд 11: I. АГРЕССИВНОЕ, СУБМИССИВНОЕ, ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНОЕ СОСТОЯНИЕ, СФОРМИРОВАННОЕ В РЕЗУЛЬТАТЕ СОЦИАЛЬНЫХ КОНФРОНТАЦИЙ (мыши линии СВА и С57 BL /6 J )

2 дня сенсорного контакта 10 или 20 дней тестирования конфронтаций Введение селективных препаратов или соответствующего растворителя Иммунизация ЭБ (5х10 8 ) Определение IgM-, IgG- АОК через 4- 9 дней после введения антигена Экспериментальные модели Анализ CD4 +, CD8 +, CD16 / 32 +

Изображение слайда
12

Слайд 12: Экспериментальные модели

II. НАСЛЕДСТВЕННО-ДЕТЕРМИНИРОВАННОЕ ДЕПРЕССИВНО- ПОДОБНОЕ СОСТОЯНИЕ (мыши линии ASC ) Родительские линии без депрессивного поведения: СВА (каталептическая линия) AKR ( некаталептическая линия) Мыши линии ASC (Antidepressant sensitive catalepsy) с повышенной предрасположенностью к каталепсии и ВЫРАЖЕННЫМ ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНЫМ ПОВЕДЕНИЕМ: 1. Увеличение времени неподвижности в тесте «принудительное плавание» (Базовкина и др., 2005); 2. Увеличение времени неподвижности в тесте « tail suspension » (Базовкина и др., 2005); 3. Снижение двигательной активности в тесте «открытое поле» (Базовкина и др., 2005); 4. Нарушение процесса угашения выработанной реакции пассивного избегания (Дубровина и др., 2008); 5. Чувствительность к антидепрессантам (имипрамину и флуоксетину) (Тихонова и др., 2005, 2009).

Изображение слайда
13

Слайд 13: Модели исследования:

I. Агрессивность, индуцированная социальным стрессом Агрессия нападения « offensive » у мышей линий СВА и C57BL/6J с различным опытом побед в течение длительных конфронтационных взаимодействий ; II. Наследственно детерминированная агрессия: Защитно-оборонительная « defensive » агрессия у крыс, селектированных в течение 70-75 поколений на высокую агрессивность и ее отсутствие по отношению к человеку (агрессия, вызванная страхом)

Изображение слайда
14

Слайд 14

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К РАЗЛИЧНОМУ УРОВНЮ АГРЕССИВНОСТИ У КРЫС ( 70-75 поколение селекции диких серых крыс на отсутствие и усиление агрессивности по отношению к человеку, ФГБУН «ИЦиГ» СО РАН) Крысы c высокой агрессивностью характеризуются: высокой межсамцовой агрессией, повышенным уровнем эмоциональности, тревожности и стресс-реактивности, пониженной исследовательской активностью и способностью к пространственному обучению в водном тесте Морриса ( Plyusnina, Oskina, 1997; Albert et al., 2008; Konoshenko et al., 2013) ; повышенным базальным уровнем адренокортикотропного гормона (АКТГ) и кортикостерона, а также реакцией гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы на стресс ( Naumenko et al., 1989; Plyusnina, Oskina, 1997) пониженным содержанием серотонина и его метаболита в среднем мозге и гипоталамусе, сниженной функциональной активностью 5-НТ 1А - и 5-НТ 1С – рецепторов, экспрессией генов 5-НТ 1А - и 5-НТ 1С - рецепторов и высоким уровнем дофамина в стриатуме и мезолимбической системе ( Naumenko et al., 1989; Plyusnina, Oskina, 1997; Albert et al., 2008; Popova et al.,1998, 2010; Naumenko et al., 2009, 2013)

Изображение слайда
15

Слайд 15

3. Оценка иммунологической реактивности а). лазерный проточный цитометр-« FACS С alibur ( Becton Dickinson, USA ) с програмным обеспечением ” CellQuest Pro ” для анализа субпопуляционного состава клеток в иммунокомпетентных органах и периферической крови; для приготовления клеток используется счетчик форменных элементов крови «Пикоскель ПС-4м» (ООО НПФ «Лабовэй», Россия). В последние годы появились наборы, позволяющие методом проточной цитометрии определять и цитокины.

Изображение слайда
16

Слайд 16

Изображение слайда
17

Слайд 17: Возможности проточной цитометрии

Изображение слайда
18

Слайд 18

Определение методом проточной цитофлюориметрии субпопуляции лимфоцитов меченных трёхцветными МАТ CD3+ CD4+ CD25+

Изображение слайда
19

Слайд 19: Процентное содержание CD4 +, CD 8 + Т-клеток и их сооотношения ( CD4 + / CD 8 + ) в периферической крови и селезенке у неиммунизированных мышей линий CBA и ASC

* * CD4 + Т-хелперы CD 8 + супрессорные/цитотоксические Т-клетки Периферическая кровь + ** * * * Селезенка Процентное содержание CD4 +, CD 8 + Т-клеток и их сооотношения ( CD4 + / CD 8 + ) в периферической крови и селезенке у неиммунизированных мышей линий CBA и ASC CD4 + / CD8 +

Изображение слайда
20

Слайд 20

Изменение числа CD4 + и CD8 + Т-клеток в костном мозге у агрессивных и субмиссивных неиммунизированных мышей линии C57BL/6J после 10-ти и 20-ти дневного тестирования конфронтаций Агрессивные мыши Субмиссивные мыши * - Р<0,01 * * Р<0,001 по сравнению с контролем ; о - Р<0,01 по сравнению с агрессивными животными 10-ти дневного теста # - Р< 0,05 по сравнению с субмиссивными животными 10-ти дневного теста

Изображение слайда
21

Слайд 21: Определение цитокинов методом проточной цитометрии (наборы и программа FlowCytomix)

Изображение слайда
22

Слайд 22

На цитограмме флюоресценции отображаются три цитокина пула Р1 и два других цитокина пула Р2

Изображение слайда
23

Слайд 23: Данные отчета FlowCytomix по содержанию цитокинов у крыс

Изображение слайда
24

Слайд 24: Содержание IL-1альфа и MCP-1 ( пг/мл) в периферической крови у агрессивных и ручных крыс

Ручные крысы Агрессивные крысы

Изображение слайда
25

Слайд 25

б). Определение в селезенке числа IgM- и IgG-антителообразующих клеток по числу прямых и непрямых (при добавлении анти-мышинных антител к иммуноглобулину G) бляшек. Хотя метод предложен в конце 60 годов, он рассматривается и сегодня как «золотой стандарт» оценки числа антителообразующих клеток на введение Т-зависимого антигена ( Ladics, 2007), по которому можно судить о продукции антиген-специфических антител, являющихся основным защитным механизмом гуморального иммунного ответа. Оборудование – микроскопы, термостаты, бифокальная лупа.

Изображение слайда
26

Слайд 26

б).

Изображение слайда
27

Слайд 27

б). б).

Изображение слайда
28

Последний слайд презентации: Технологии, используемые в исследованиях лаборатории механизмов нейрохимической

б). Определение в селезенке числа IgM- и IgG-антителообразующих клеток по числу прямых и непрямых (при добавлении анти-мышинных антител к иммуноглобулину G) бляшек. Хотя метод предложен в конце 60 годов, он рассматривается и сегодня как «золотой стандарт» оценки числа антителообразующих клеток на введение Т-зависимого антигена ( Ladics, 2007), по которому можно судить о продукции антиген-специфических антител, являющихся основным защитным механизмом гуморального иммунного ответа. Оборудование – микроскопы, термостаты, бифокальная лупа.

Изображение слайда