Презентация на тему: Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ

Реклама. Продолжение ниже
Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ
Основные этапы гистологического исследования
Взятие материала в операционном блоке
Транспортировка материала в лабораторию
Вырезка и фиксация
Разделение потоков
Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ
Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ
Фиксация кусочка ткани толщиной 3 мм
Почему важна фиксация?
Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ
Проводка ткани
Заливка
Контрольные образцы
Микротомия
Окраска ГЭ
Кто ответственный за выполнение этапа?
Пример СОП для подготовки к ИГХ
Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ
Спасибо за внимание !
1/20
Средняя оценка: 4.8/5 (всего оценок: 10)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (2314 Кб)
Реклама. Продолжение ниже
1

Первый слайд презентации: Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ

Пешков М.В. Патолого-анатомическое бюро г. Таганрог 2020

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
2

Слайд 2: Основные этапы гистологического исследования

Взятие материала в оперблоке Транспортировка в лабораторию Вырезка и фиксация Проводка Заливка Микротомия Окраска ГЭ

Изображение слайда
1/1
3

Слайд 3: Взятие материала в операционном блоке

Максимально быстрое погружение в фиксатор Фиксация в 10% нейтральном забуференном формалине * Фиксация отдельного образца в 70% этаноле или Карнуа для молекулярного тестирования * Сохранение в холоде и упаковка материала в вакуумные пакеты с соблюдением температурного режима.

Изображение слайда
1/1
4

Слайд 4: Транспортировка материала в лабораторию

Максимально быстрая доставка (формалин не проникает глубже 1 см от поверхности) При упаковке в вакууме соблюдение температурного режима (максимум +4 o С) Четко и правильно заполненный бланк направления и маркировка контейнера с образцом

Изображение слайда
1/1
5

Слайд 5: Вырезка и фиксация

Выполняется только патологом Отсчет времени фиксации начинается с момента вырезки Кассету не заполнять более 75% объема До 2 мм в диаметре – мелкие образцы До 2.5 х 2.5 х 0.3 см – обычные образцы – лимитируются объемом кассеты (не более 75 % объема)

Изображение слайда
1/1
6

Слайд 6: Разделение потоков

Эндоскопические и любые мелкие биоптаты до 2 мм – короткое расписание Мелкие биоптаты должны быть информативными Хирургические образцы до 3 мм – длинное расписание Любые трудные образцы должны проводиться по обычному расписанию с отличным результатом

Изображение слайда
1/1
7

Слайд 7

Правила адекватной фиксации 24 часа При комнатной температуре Или 18 часов при 37 о С 2-3 мм Толщина кусочков ткани для проводки 20:1 Соотношение объемов фиксатора и ткани 10% NBF 10% нейтральный забуференный формалин (одна смена, новый)

Изображение слайда
1/1
Реклама. Продолжение ниже
8

Слайд 8

Время в NBF ( часы ) Пропитывание как % толщины Уровень связывания Толщина ткани (мм) % равновесия 1 2 3 4 5 25 о C 37 о C 1 100 66 44 33 26 5 10 2 94 62 47 37 10 21 4 88 66 53 20 40 8 93 75 39 68 12 91 57 87 18 81 100 24 100 100% при 25 о с за 0,6 ч 2,3 ч 5,2 ч 9,2 ч 14,3 ч 100% при 37 о с за 0,3 ч 1,3 ч 3,0 ч 5,3 ч 8,2 ч 100% при 42 о с за 0,3 ч 1,0 ч 2,3 ч 4,0 ч 6,2 ч Уровни пропитывания и связывания формалина

Изображение слайда
1/1
9

Слайд 9: Фиксация кусочка ткани толщиной 3 мм

Для объектов толщиной 3 мм Температура 20 о С 25 о С 37 о С 42 о С 100% пропитается за 7,1 ч 5,2 ч 3 ч 2,3 ч 100% формалина свяжется с белками за 33 ч 24 ч 18 ч 10 ч 50% белков перекрестно свяжутся за 66 ч 48 ч 36 ч 20 ч 100% белков перекрестно свяжутся за 132 ч 96 ч 72 ч 40 ч

Изображение слайда
1/1
10

Слайд 10: Почему важна фиксация?

Формалин образует очень прочные перекрестные связи между молекулами белков Эти связи помогают сохранить ткани в постоянных переходах от неполярных к полярным жидкостям и наоборот Перекрестные связи разрываются при высокотемпературной демаскировке и антигены становятся доступными для ИГХ

Изображение слайда
1/1
11

Слайд 11

Изображение слайда
1/1
12

Слайд 12: Проводка ткани

Лучше щадящие и мягкие реактивы, дающие срезы толщиной 3-4 мкм без складок и затруднений Не передерживать ткани в реагентах Не перегревать ткани во время проводки Отсрочку проводки делать в первом спирте Малые образцы проводить по короткому расписанию Неверно проведенные и исправленные образцы могут дать ложноположительные или ложноотрицательные результаты Не использовать для декальцинации кислотные декальцинаторы и электролиз, ультразвук, термостаты; не передерживать в растворах.

Изображение слайда
1/1
13

Слайд 13: Заливка

Образцы заливаются в твердый парафин – он позволяет сделать более тонкие срезы Нагрев заливочного парафина в термостате или заливочном центре должен быть выше точки плавления парафина на 4-5 о С Залитый образец должен представлять единое целое с парафином, а не отделяться от него Правила для ориентировки образцов – общие. Конкретные указания может дать патолог, вырезавший материал.

Изображение слайда
1/1
14

Слайд 14: Контрольные образцы

Желательно использовать внутренние положительные контрольные структуры, поскольку фиксация разных объектов отличается Контроль можно и нужно располагать на одном и том же стекле, так как реактивы покрывают всю площадь стекла, кроме лейбла

Изображение слайда
1/1
Реклама. Продолжение ниже
15

Слайд 15: Микротомия

Микротомия по общим правилам приготовления препаратов Вода – чистая дистиллированная или деионизированная, с добавкой ПАВ ( tween20 ) Срезы должны быть ровные, толщиной 3-4 мкм, без складок и пузырей под ними Стекла: с поли- L- лизином, Super frost, +, подходящие для Ventana. Сушить стекла: вертикально, термостат, 60 мин, 60 о С.

Изображение слайда
1/1
16

Слайд 16: Окраска ГЭ

Обязательная обзорная окраска перед ИГХ исследованием. Отдельное стекло ГЭ должно быть сделано, если ИГХ-архив хранится отдельно от основных случаев.

Изображение слайда
1/1
17

Слайд 17: Кто ответственный за выполнение этапа?

Взятие – хирург Подготовка к транспортировке – м/с оперблока Транспортировка – санитарка оперблока /курьер Прием материала – лаборант/медрегистратор Вырезка – вырезающий патолог Проводка, микротомия, окраска – лаборант/медицинский лаб техник, отвечающий за работу с ИГХ-тестами и аппаратурой Архивирование – лаборант/медрегистратор Ответ – патолог/зав отделением

Изображение слайда
1/1
18

Слайд 18: Пример СОП для подготовки к ИГХ

ЧЕК-ЛИСТ КОМПЕТЕНЦИЙ. ГЛАВНАЯ ЗАДАЧА: ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕДУРЫ. 1 – Получить запросы, распечатанные на компьютере для всех ИГХ-случаев за прошедший день 2 – извлечь из термостата высушенные стекла (сушить минимум с 7 часов прошлого вечера) 3 – Проверить, чтобы все срезы были на +стеклах 4 – При наличии некоторых «дополнительных стекол» из случаев для стекол, используемых для ИГХ, проверить наличие положительных контролей 5 – Сверить тип иммуноглобулина для каждого случая с типом имммуноглобулина, используемого в стеклах для отрицательного контроля 6 – Проверить, чтобы все требуемые стекла были срезаны 7 – Если пропущены какие - то запрошенные стекла, обратиться к старшему технику за причиной и дать заказ на их резку до 4 утра ночной смене 8 – Рассортировать стекла по случаям пока заполняются стейнеры (48 стекол/запуск) 9 – Подготовить рабочие программы, а также количества реагентов ( мкл ) 10- Запустить программу, распечатать все нужные лейблы 11 –Приклеить лейблы к стеклам и разместить стекла в пластиковые стойки

Изображение слайда
1/1
19

Слайд 19

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
20

Последний слайд презентации: Преаналитический этап подготовки материала для ИГХ: Спасибо за внимание !

Спонсор вебинара : компания Рош Диагностика Рус Максим Валерьевич Пешков – биолог отделения биопсийных и цитологических исследований патолого-анатомического бюро г. Таганрога Maxim_71@mail.ru ( ВК: https ://vk.com/id422924423 )

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
Реклама. Продолжение ниже