Презентация на тему: Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний

Реклама. Продолжение ниже
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Режимы работы АСМ
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний
1/41
Средняя оценка: 4.3/5 (всего оценок: 82)
Код скопирован в буфер обмена
Скачать (42091 Кб)
Реклама. Продолжение ниже
1

Первый слайд презентации

Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний Новгород 2020 1

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/3
2

Слайд 2

Оптические микроскопы Ближнепольный оптический микроскоп Конфокальный микроскоп Двухфотонный лазерный микроскоп Электронные микроскопы Просвечивающий электронный микроскоп Растровый электронный микроскоп Сканирующий зондовый микроскоп Сканирующий атомно-силовой микроскоп Сканирующий туннельный микроскоп Рентгеновские микроскопы Рентгеновские микроскопы отражательные Рентгеновские микроскопы проекционные Лазерный рентгеновский микроскоп ( XFEL ) Виды микроскопов 2

Изображение слайда
1/1
3

Слайд 3

В 1982 году (момент опубликования в Phys. Rev. Lett.) Генрихом Рорером и Гердом Биннигом был открыт метода сканирующей туннельной микроскопии. В 1986 году Гердом Биннигом, Кельвином Куэйтом и Кристофером Гербером в США, был изобретен первый атомно-силовой микроскоп. 3

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
4

Слайд 4

Атомно-силовая микроскопия — вид зондовой микроскопии, в основе которого лежит силовое взаимодействие атомов зонда и исследуемого образца. Атомно-силовой микроскоп (АСМ, англ. AFM – atomic-force microscope ) - сканирующий зондовый микроскоп высокого разрешения. Используется для определения рельефа поверхности с разрешением от десятков ангстрем вплоть до атомарного. В отличие от сканирующего туннельного микроскопа, с помощью атомно-силового микроскопа можно исследовать как проводящие, так и непроводящие поверхности. 4

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
5

Слайд 5

В сканирующих зондовых микроскопах исследование микрорельефа поверхности и ее локальных свойств проводится с помощью специальным образом приготовленных зондов в виде игл. Рабочая часть таких зондов (острие) имеет размеры порядка десяти нанометров. Характерное расстояние между зондом и поверхностью образцов в зондовых микроскопах по порядку величин составляет 0,1 – 10 нм. Зонд АСМ 5

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
6

Слайд 6

Сравнительные размеры зондов 6

Изображение слайда
1/1
7

Слайд 7

На расстоянии около одного ангстрема между атомами образца и атомом зонда ( кантилевера ) возникают силы отталкивания, а на больших расстояниях - силы притяжения. Идея устройства очень проста: кантилевер, перемещаясь относительно поверхности и реагируя на силовое взаимодействие, регистрирует ее рельеф. На основании прибора укреплен цилиндр, в котором находится сканер – пьезоэлектрическая керамика, изменяющая свои размеры при приложении электрического поля Принцип работы АСМ 7

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
Реклама. Продолжение ниже
8

Слайд 8

8

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
9

Слайд 9

9

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
10

Слайд 10: Режимы работы АСМ

Кантилевер непосредственно касается поверхности и повторяет её форму по мере прохождения поверхности Бесконтактный и полуконтактный режим характеризуются дополнительным условием сканирования, которое позволяет осуществить более щадящее и тонкое сканирование. Кантилевер жестко связывается с пъезоэлементом и колеблется со своей резонансной частотой. Детектируется не только амплитудное отклонение, но и фазовое. 10

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
11

Слайд 11

Преимущества: Атомно-силовая микроскопия позволяет получить истинно трёхмерный рельеф поверхности; Изучаемая поверхность не требует нанесения проводящего металлического покрытия, которое часто приводит к заметной деформации поверхности. Б ольшинство режимов атомно-силовой микроскопии могут быть реализованы на воздухе или даже в жидкости. Недостатки: Небольшой размер поля сканирования.; Низкая скорость сканирования поверхности, по сравнению с электронным микроскопом; Нелинейность, гистерезис и ползучесть (крип) пьезокерамики сканера, являются причинами сильных искажения АСМ-изображений. 11

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/3
12

Слайд 12

Нейтрофильный гранулоцит Сегментированное ядро Гранулы В крови человека содержится 2,0–7,5×10 9 /л нейтрофилов, что составляет 50–70 % от общего числа лейкоцитов крови. В кровотоке присутствует только 1–2% общего числа зрелых нейтрофилов в организме ( остальные представлены в тканях, преимущественно в костном мозгу). Диаметр нейтрофилов составляет 9–12 мкм. Им свойственна уникальная морфология: ядро сегментированное (обычно состоит из 3 сегментов ) с плотно упакованным хроматином цитоплазма содержит гранулы. 12

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
13

Слайд 13

Функции нейтрофильных гранулоцитов 13

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/3
14

Слайд 14

14 Диапедез НГ

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
Реклама. Продолжение ниже
15

Слайд 15

15 Парацеллюлярная миграция НГ

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
16

Слайд 16

Контроль Характерна небольшая максимальная и средняя высота клеток, внешний вид клеток однообразен. Псевдоподии отсутствуют, что свидетельствует об отсутствии активации клетки. Преобладает площадь адгезии клетки. В ряде случаев можно наблюдать сегменты ядра. 6 мкм 6 мкм 6 мкм Сегменты ядра 6 мкм 6 мкм 16

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/4
17

Слайд 17

17

Изображение слайда
1/1
18

Слайд 18

КТ 1 Морфология клеток разнообразна, в большинстве случаев форма не правильная. Клетки выше. Площадь адгезии уменьшается. Отмечаются повреждения некоторых нейтрофилов. Ряд клеток морфологически напоминают нейтрофилы из контрольных образцов. 6 мкм 6 мкм 6 мкм Апопотическое тельце 6 мкм 6 мкм 18

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
19

Слайд 19

КТ 2 Морфология клеток разнообразна. Во многих случаях большое количество псевдоподий, что свидетельствует об активации. Визуально клетки выше чем в контроле. Поверхность неоднородна. На подложке большое количество фрагментов похожих на разрушенные клетки. Сегменты ядра не визуализируются. 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 19

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
20

Слайд 20

КТ- 3 Морфология клеток однообразна. Края ровные. Форма чаще правильная в большинстве случаев близка к округлой или куполообразной. Нет признаков активации. Площадь адгезии меньше. Высота значительная. Поверхность чаще однородная. Разрушенных клеток мало. 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 20

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
21

Слайд 21

КТ- 4 Морфология сходна с клетками в предыдущем эксперименте, но более разнообразна. Высота увеличивается относительно контроля. Площадь адгезии так же значительно меньше чем в контроле. В ряде случаев поверхность клеток грубо деформирована. Есть частично разрушенные клетки. 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 21

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
22

Слайд 22

КТ- 5 В большинстве случаев форма клеток правильная, округлая или куполообразная. Размер клеток заметно меньше чем в остальных образцах. У многих клеток поверхность не однородная, зернистая. Разрушенных клеток не много. Псевдоподии встречаются у очень малого числа клеток. 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 22

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
23

Слайд 23

КТ- 6 Клетки преимущественно однообразны, правильной округлой или куполообразной формы. Встречаются псевдоподии. Поверхность клеток не однородна. В образце наблюдается большое количество разрушенных клеток. 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 23

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
24

Слайд 24

Международный номенклатурный комитет по клеточной гибели официально выделяет 12 типов клеточной гибели 24

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
25

Слайд 25

а г в е б д 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм 6 мкм Механизмы гибели нейтрофильных гранулоцитов (фиксированные клетки) Гибель нейтрофилов под воздействием КТ: а - контроль; б - апоптоз ; в - быстрый нетоз ; г - аутофагия ; д - некроз; е-мумификация. 25

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/7
26

Слайд 26

Основные механизмы гибели нейтрофилов Для исхода воспалительного процесса важно по какому механизму погибают нейтрофилы : Некроптоз Некроз Signal inducing cell programmed death Protein kinase MLKL Phosphorylation DAMPs Enzymes ATP Inflammation Others DAMPs HMGB1 NLRP3 IL1β Inflammation Inflammasoma 26

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/5
27

Слайд 27

Динамика некроза нейтрофилов, исследованная методом АСМ 27

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
28

Слайд 28

Основные механизмы гибели нейтрофилов Phagophore Bacteria Bacteria Bacteria Regulation of inflammation Cell death by autophagy Vacualisation of cytoplasm Autolysosome Autolysosome Lysosome LC3 p62 UB p62 UB Аутофагия 28 6 мкм

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/4
29

Слайд 29

Основные механизмы гибели нейтрофилов cytochrome C + APAF1 caspase – 8 – activation caspase – 9 – activation Activation of effector caspases cascade Apoptosis bodies Without inflammation Mitochondria Апоптоз Apoptosis 29

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/6
30

Слайд 30

Основные механизмы гибели нейтрофилов Signal inducing NET formation MPO NE ROS Adhesion Inflammation Localisation and resolution of inflammation Bacteria Нетоз 30

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/4
31

Слайд 31

Изучение динамики формирования нетоза в живых препаратах после инкубации со S.aureus 70 мин 85 мин Опсонизированный S. aureus 95 мин 20 мкм 45 мкм 25 мкм 31

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/4
32

Слайд 32

Обрезание ДНК зондом после первого сканирования 105 мин Клетка после формирования длинных нетотических сетей полностью расходует свое внутреннее содержимое и идентифицируется только как «тень» клетки Изучение динамики формирования нетоза в живых препаратах после инкубации со S.aureus 45 мкм 45 мкм 45 мкм 115 мин 125 мин 32

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/4
33

Слайд 33

Структурно-морфологические особенности классического нетоза, исследованные методом СЭМ 8 мкм 10 мкм 33

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/3
34

Слайд 34

Исходы разных вариантов клеточной гибели 34

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
35

Слайд 35

Основные черты нетоза, идентифицированные АСМ 35

Изображение слайда
1/1
36

Слайд 36

Проблемы исследования нетоза методом АСМ 200 мкм 100 мкм 36

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
Изображение для работы со слайдом
1/3
37

Слайд 37

Мумификация впервые была открыта методом АСМ Мумификация нейтрофилов, исследованная методом АСМ Pleskova S.N. The use of the light microscopy and the atomic force microscopy for studying cell death under hydrogen peroxide influence. «Current microscopy contributions to advances in science and technology». Editor: Antonio Méndez -Vilas. Publisher: Formatex Research Center. Volume 1 ISBN (13): 978-84-939843-5-9. Publication date: December 2012 p. 602 – 609. Pleskova S.N., Mikheeva E.R., Gornostaeva E.E. The Interaction between Human Blood Neutrophil Granulocytes and Quantum Dots // Micron. 105 (2018) 82–92. Doi : 10.1016/j.micron.2017.11.011 Pleskova S.N., Gorshkova E.N., Novikov V.V., Solioz M. Treatment by serum up-conversion nanoparticles in the fluoride matrix changes the mechanism of cell death and the elasticity of the membrane // Micron. 2016. – V. 90. P. 2 3 – 32. 37

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
38

Слайд 38

Диаграмма силовых кривых воздействия кантилевера на мембрану ж ивых клеток программы 38

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
39

Слайд 39

Причина Особенности Квантовые точки Пероксид водорода Наночастицы магнетита Ап-конверсионные наночастицы Экстремально высокая ригидность Поверхность “ изрытая ” с выпуклостями и впадинами Клетки не меняют морфологию в течение 120 мин Окрашиваются пропидиумом йодидом Нейтрофилы в контроле 26.75 ± 2.49 kPa Мумифицированные нейтрофилы 143.21 ± 22.19 kPa 39

Изображение слайда
1/1
40

Слайд 40

40 100 нм

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
41

Последний слайд презентации: Исследование ж ивых клеток методом атомно-силовой микроскопии Нижний

41 Спасибо за внимание

Изображение слайда
Изображение для работы со слайдом
1/2
Реклама. Продолжение ниже