Подготовила: Темирова А.Н. Д119
Введение Серологические реакции Иммунологические реакции Реакция Вассермана ПЦР-диагностика Список литературы
Лабораторная диагностика в профессиональной деятельности врача-клинициста занимает особое место: без использования в клинической практике лабораторных исследований невозможно качественное медицинское обслуживание населения. В настоящее время в венерологии широко применяются иммунологические исследования, в частности при сифилисе, герпетической инфекции, вирусных гепатитах В и С, вирусе папилломы человека (ВПЧ) и других венерических инфекциях.
Серологические исследования — это методы изучения определенных антител или антигенов в сыворотке крови больных, основанные на реакциях иммунитета. Серологические исследования включают в себя различные серологические реакции: 1. Реакция агглютинации. 2. Реакция преципитации. 3. Реакция нейтрализации. 4. Реакция с участием комплемента. 5. Реакция с использованием меченых антител или антигенов.
Реакции агглютинации — это простые реакции склеивания корпускулярных антигенов с помощью антител. Различают: — прямые реакции агглютинации, которые используют для выявления антител в сыворотке крови больного. Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного вызывает образование хлопьевидного осадка (положительная реакция склеивания микробов антителами). Используется для определения брюшного тифа, паратифа и др. — реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка. Используется для определения беременности, выявления повышенной чувствительности больных к лекарственным препаратам и гормонам; — реакция торможения гемагглютинации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате теряют свойство склеивать эритроциты. Используется для диагностики вирусных болезней; — реакция коагглютинации — разновидность реакции агглютинации, в которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой.
Реакции преципитации — реакции, в которых происходит осаждение комплекса антиген-антитело. Антиген в данном случае должен быть растворимым. Осадок комплекса антиген-антитело называется преципитатом. Реакцию ставят путем наслоения раствора антигена на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении антиген-антитело на границе этих растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Наибольшее распространение получила реакция преципитации в полужидком геле агара (двойная иммуно-иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.). Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента.
Реакция нейтрализации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные клетки или ткани. При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.
Реакции с участием комплемента основаны на активации комплемента в результате присоединения его к комплексу антиген-антитело. Если комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент присоединяется к комплексу эритроцит-антиэритроцитарное антитело, вызывая тем самым гемолиз (разрушение) эритроцитов (реакция радиального гемолиза). Применяется для диагностики инфекционных болезней, в частности, сифилиса.
Реакция основана на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками, меченными флюорохромами, способны светиться в ультрафиолетовых лучах люминисцентного микроскопа (реакция иммунофлюоресценции ). В иммуноферментном анализе вместо флюорохромов иммунную сыворотку можно метить ферментом ( пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой). Реакцию оценивают по окрашиванию раствора в желто-коричневый ( пероксидаза ) или желто-зеленый ( фосфотаза ) цвет.
Иммунологические методы исследования — диагностические методы исследования, основанные на специфическом взаимодействии антигенов и антител. Широко используются для лабораторной диагностики инфекционных и паразитарных болезней, определения групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, видовой принадлежности белка, распознавания аллергии и аутоиммунных болезней, беременности, гормональных нарушений, а также в научно-исследовательской работе. Они включают серологические исследования, или серологические реакции, к которым относят обычно реакции прямого воздействия антигенов и антител сыворотки крови in vitro.
Реакция Вассермана — это так называемая реакция связывания комплемента (РСК). Суть метода заключается в следующем: в сыворотку крови пациента, в которой вероятно есть антитела к сифилису (белки-защитники от этой болезни), добавляют кардиолипиновый антиген — искусственный белок-агрессор (аналог трепонемы), который синтезируют из бычьего сердца — и комплемент (дополнительный связывающий белок). Если антигены и антитела подходят друг другу, то с помощью комплемента они связываются и выпадают в осадок. Этот осадок означает, что в крови человека есть подходящие антитела, которые среагировали именно на вторжение искусственного аналога сифилиса. Следовательно, с большой вероятностью в крови человека есть реальный возбудитель сифилиса для борьбы с которым и появились эти белки.
Дерматовенерология / Под ред.А.А. Кубановой. - М.:ДЭКС-ПРЕСС, 2010. -428 с. - (Клинические рекомендации. Российское общество дерматовенерологов ) Клиническая дерматовенерология : в 2-х т. / Под ред. Ю.К. Скрипкина,Ю.С. Бутова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. Клиническая лабораторная диагностика [Текст]: нац. рук: в 2 т. / под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - Т. 1. - 2012. - 926 с. - 3 экз. Соколовский Е.В. и др. Лабораторная диагностика сифилиса: Метод. рекомендации/Соколовский Е.В., Савичева А.М., Смирнова Т. С. и др. - СПб.: Изд-во Н-Л, 2009. - 72 с. Руководство по лабораторным методам диагностики [Электронный ресурс] / А. А. Кишкун. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. - 756 с.
Slide-Share